« De la théorie à la pratique : maîtriser la HILIC »

Ce short course s’adresse à la fois aux débutants souhaitant s’initier à l’utilisation du mode HILIC, mais aussi aux utilisateurs plus expérimentés qui ont besoin de comprendre comment améliorer la robustesse, la répétabilité et les performances des méthodes HILIC.

La chromatographie d’interaction hydrophile (HILIC) est devenue une technique incontournable pour analyser les composés polaires peu retenus en phase inverse. Elle est notamment utilisée en analyse pharmaceutique, pour la caractérisation des biomédicaments et en métabolomique, où rétention accrue, sensibilité en spectrométrie de masse et sélectivité complémentaire sont recherchées. Malgré ses atouts, la HILIC reste perçue comme complexe en raison de ses mécanismes de rétention multiples, de sa sensibilité aux conditions expérimentales et de sa répétabilité parfois limitée.

Ce cours présentera les principes et les aspects pratiques de la HILIC, notamment ses mécanismes de rétention, l’influence du diluant d’échantillon sur la rétention et la forme des pics, ainsi que les conditions nécessaires à une bonne répétabilité en mode gradient. Il abordera aussi le couplage à la spectrométrie de masse et le choix des phases mobiles et stationnaires.

Des applications allant des petites molécules à la métabolomique et à la caractérisation de biomolécules (oligonucléotides, peptides et protéines) illustreront ces notions. À l’issue du cours, les participants disposeront des connaissances nécessaires pour mettre en œuvre la HILIC et résoudre les difficultés courantes en laboratoire.